Властивості шкіри, відновленої пересадкою аутологічних кератиноцитів

При лікуванні потерпілих необхідно не тільки відновити втрачений шкірний покрив, але і домогтися задовільних косметичних і функціональних результатів.

Під час першої перев'язки (через 5-7 діб. Після трансплантації) прижилася клітинна культура під парафінізірованним покриттям виглядає як тонка білувата прозора плівка (рис. 7.14, а). У ці терміни прижилися клітини ще не щільно прикріплені до підлягає тканин. Тому при необережних маніпуляціях пересаджені кератиноцити можуть бути пошкоджені або відшаровується. Пізніше за своїм зовнішнім виглядом прижилася культура нагадує опікову рану, в якій нещодавно завершилася епіте-лізація (рис. 7.14, б). У більш пізні терміни (рис. 7.14, в) відновлена ??шкіра м'яка, еластична, легко береться в складку, за ступенем пигментированное ™ не відрізняється від інших ділянок тіла і виглядає краще, ніж при пластиці перфорованими шкірними клаптями. Віддалені косметичні результати, отримані в разі пересадки клітинної культури, зазвичай дещо гірше, ніж при пластиці суцільними розщепленими шкірними клаптями, але краще, ніж при використанні перфорованої шкіри.

У терміни до 3-4 місяців іноді відзначається досить значна ретракція (до 1 / 4) від початкової площі пересаджених багатошарових пластів кератиноцитів. Разом з тим, у кожному конкретному випадку вираженість цього процесу різна і має індивідуальний характер. Порівняння результатів різних методів пластики дозволило зробити висновок, що ступінь контракції шкіри, відновленої пересадкою клітинної культури, приблизно відповідає такий при пластиці перфорованими шкірними клаптями.

Явища дерматозу, які проявляються появою міхурів, в ранні терміни (через 1-3 місяці) після трансплантації багатошарових пластів кератиноцитів виникають частіше, ніж при здійсненні традиційної шкірної пластики. Однією з причин появи бульбашок може бути неповноцінність базальної пластини [Katz S., 1984].

У доступній літературі вдалося знайти тільки одна згадка про розвиток шкірного захворювання у потерпілого після трансплантації пластів кератиноцитів. Так, R. Zermani (1994) повідомила про випадок, коли шкірний покрив у 18-річного пацієнта з великими глибокими опіками на площі 87% був відновлений пересадкою пластів кератиноцитів. Через 5 років у нього розвинувся псоріаз типової локалізації. Проте зв'язати розвиток захворювання зі способом лікування не представляється можливим.

Особливості структури шкіри, відновленої пересадкою багатошарових пластів кератиноцитів. Дозрівання епітелію. Вже протягом першого тижня після трансплантації МПК епітелій потовщується і стратіфіціруют. У ці терміни мальпигиев шар клітин має від 8 до 15 (за даними різних авторів) рядів клітин (в середньому 13), і всі чотири шару епідермісу вже добре виражені і присутні в нормальних пропорціях. У порівнянні з нативною шкірою, з якої були отримані кератиноцити, кількість клітинних шарів у дочірніх трансплантата було, як правило, на 10-30% більше [Compton С. et al., 1989].

Процеси термінальної диференціювання відбуваються по-різному в залежності від способу ведення ран після пересадки клітинних пластів. У випадку, якщо пересаджені клітини знаходяться в сухому оточенні (на повітрі), диференціювання відбувається швидше, ніж у вологому середовищі. Як правило, роговий шар має нормальну будову, в деяких випадках спостерігали явища паракератозу.

Є дані, що в процесі вирощування культури кератит-ноцітов з клітинної культури губляться клітини Лангерганса. Разом з тим, у шкірі, відновленої пересадкою епітеліальних пластів, ці клітини присутні. Багато дослідників вважають, що клітини Лангерганса можуть мігрувати в прижився пласт з підлеглих тканин.

Формування дермо-епідермальних зв'язків. У ранні терміни після трансплантації кордон дерми та епідермісу являє собою практично пряму лінію. Протягом перших 7-Юсут. міцного зв'язку між прижившись клітинними пластами і підлеглою тканиною немає (рис. 7.15. Тому при взятті біоптатів нерідко відбувається відшаровування епідермісу. У ці терміни епідерміс має звичайне будова, структура кератиноцитів близька до норми. У більш пізні терміни (через 12-15 діб. Після трансплантації і пізніше) зв'язок прижилося епітеліального пласта з підлягають тканинами вже міцна, він не відшаровується при виконанні маніпуляцій.

Для ілюстрації відмінностей в гістологічної структурі шкіри наведено рис. 7.16. Чітко видно, що в прижилося клапті

розщепленої шкіри (див. рис. 7.16, а), пересадженою на гранулюючих рани, на 30-у добу після пластики є багатошаровий диференційований епідерміс. Дермоепідермальная кордон представлена ??хвилястою неглибокої лінією. Відносно невелика глибина сосочків (порівняно з інтактною шкірою) зумовлена ??тим, що на ранові поверхні переносили розщеплений клапоть шкіри товщиною 0,2 мм, зрізання шкіри проводилося на рівні сосочків.

У шкірі, відновленої пересадкою багатошарових пластів кера-тіноцітов (див рис. 7.16, б), в ці терміни є багатошаровий диференційований епідерміс, дермоепідермальная кордон представлена ??прямою лінією.

На кінець 2-го місяця в шкірі, відновленої пересадкою багатошарових пластів кератиноцитів, може починатися формування неглибоких сосочків і придатків шкіри, зв'язок дерми та епідермісу стає міцнішою. Рік по тому після пластики межа між дермою і епідермісом являє собою хвилясту лінію, сформовані мікро-і ультраструктурні вирости. До цього терміну вже практично повністю сформована базальна мембрана.

Певний інтерес представляє також динаміка формування базальної пластинки. Окремі елементи базальної пластинки виявляються досить рано. Вже на 5-у добу після трансплантації імуногістохімічними методами визначаються колаген IV типу, ламінін і BMZ-антиген. Формування полудесмосом відбувається, починаючи з 3-х і завершується до 7-10 діб. У ці терміни полудесмосомами більш дрібні в порівнянні з такими в нормальному епідермісі. Через 2-4 тижні полудесмосомами дозрівають і мають нормальну будову. Кріплять фібрили (КФ) у невеликій кількості з'являються через 1 тиждень після трансплантації, через 3 тижні вони вже виглядають більш товстими, їх кількість збільшується. Таким чином, аж до 12 місяців після трансплантації, ультраструктура дермо-епідермальних зв'язків є незрілою в порівнянні з цілісною шкірою, але практично не відрізняється від такої в заживших осередках перфорованої шкіри. Дозрівання кріплять фібрил відбувається повільно і лише через 1-2 роки після трансплантації вони по своїй товщині, частоті розташування і архітектоніці вже нагадували нормальну шкіру.

Грануляційна тканина під прижилися пластами кератиноцитів протягом 6-8 тижнів визрівала в рубцеву тканину. У більш пізні терміни колагенові та еластичні волокна змінювалися. Протягом 4-5 років після трансплантації відбувалася регенерація еластину, у зв'язку з чим вираженість рубцевих змін в ці терміни була значно нижчою, ніж у шкірі, відновленої перфорованими шкірними клаптями.

Відновлення шкірної чутливості в ділянках, де пересаджували МПК, відбувалося в ті ж терміни, що і в сітчастих шкірних клаптиках. Однак регенеровані нервові закінчення розташовувалися тільки периваскулярно і не проникали в епідерміс. С. Compton і співавт. (1989) при вивченні біоптатів в ранні терміни після трансплантації не виявили яких-небудь ознак формування придатків шкіри (потових, сальних залоз і волосяних фолікулів). Відсутність придатків шкіри в ранні терміни після відновлення шкіри цілком з'ясовно. J. Rives і співавт. (1994) при дослідженні біоптатів через 2 роки після пластики не виявили в дермі еластичних волокон, нервів і придатків шкіри. Можливість формування волосяних фолікулів в шкірі, відновленої пересадкою клітинних пластів кератиноцитів, до кінця не доведена. Однак, відомо, що дерма стимулює появу волосяних фолікулів [Jahoda С. et al., 1984]. L. Dubetret, B. Coulomb (1988) вказували на те, що ФБ дерми індукують формування волосяних фолікулів.

Таким чином, в результаті приживлення вирощених in vitro кератиноцитів формується шкірний покрив, не поступається за багатьма характеристиками шкірі, відновленої традиційними методами шкірної пластики. Шкіра на ділянках, де відбулося приживлення клітинної культури за зовнішнім виглядом і основних фізичних характеристиках близька до інтактною.